VON WILLEBRAND -TEKIJÄ

Johdanto

Von Willebrand -tekijä on multimeerinen glykoproteiini, joka toimii hyytymistekijä VIII:n kantajamolekyylinä ja välittää trombosyyttien adheesiota endoteelisolukon alta paljastuneeseen verisuonen seinämään. Von Willebrand -tekijän määrä plasmassa lisääntyy iän myötä, raskauden aikana, akuutin faasin reaktioissa ja laajoissa endoteelisoluvaurioissa. VW-tekijän matalin perustaso saadaan varmimmin mitattua, kun akuutin faasin reaktion aiheuttavista tilanteista on kulunut vähintään kolme viikkoa ja raskauden päättymisestä vähintään kolme kuukautta.

Von Willebrandin taudissa von Willebrand -tekijän määrä voi olla alentunut ja/tai tekijä voi olla rakenteellisesti poikkeava. Von Willebrandin tautia on kolmea päätyyppiä. Tavallisin muoto on tyyppi 1, jossa von Willebrand -tekijää on normaalia vähemmän. Tyyppi 2:ssa (useita alaryhmiä) von Willebrand -tekijä on laadullisesti poikkeavaa. Tyyppi 3:ssa von Willebrand -tekijän synteesi puuttuu, minkä vuoksi myös hyytymistekijä VIII on kantajaproteiininsa puutoksen johdosta vahvasti alentunut.

Von Willebrandin taudin diagnoosi voidaan tehdä, jos potilaalla on poikkeava vuototaipumus ja selvästi pienentynyt von Willebrand -tekijän aktiivisuus kahdessa eri näytteessä. Diagnoosia tukee positiivinen sukuanamneesi. Von Willebrand -tekijä on akuutin faasin proteiini, joten lievässä von Willebrandin taudissa sen aktiivisuus voi olla ajoittain normaalikin. Mikäli tutkimusten tulokset viittaavat von Willebrandin tautiin, tutkitaan lisäksi von Willebrand -tekijän pitoisuus (P -von Willebrand -tekijä, antigeeni). Jos von Willebrand -tekijän aktiivisuus on kontrollinäytteessäkin normaalia pienempi, tehdään diagnostisia lisätutkimuksia (von Willebrand -tekijän pitoisuus, kyky sitoutua kollageeniin ja multimeerijakauma (P -von Willebrand -tekijä, multimeerit)) taudin tyypin selvittämiseksi.

Tyypin 2 taudissa on usein suositeltavaa tehdä von Willebrandin taudin tarkempi alatyypitys. Tyypin 2B taudinkuvaan kuuluu vaihteleva-asteinen trombosytopenia. DDAVP (Octostim^®) on vasta-aiheinen 2B-tyypin von Willebrandin taudissa sen käyttöön liittyvän vaikean trombosytopenian vuoksi. Mikäli on epäily tyypin 2B von Willebrandin taudista, suositellaan pääkaupunkiseudulla tehtävää trombosyyttien funktiotutkimusta.

Indikaatiot

P -vWF-Akt: Vuototaipumuksen selvittely, von Willebrandin taudin diagnostiikka ja hoidon seuranta.

P -vWF-Ag: Vuototaipumuksen selvittely, von Willebrandin taudin diagnostiikka ja tyypitys.

P -vWFCB: Von Willebrandin taudin tyypitys.

P -vWF-Ty: von Willebrandin taudin diagnostiikan jatkotutkimus ja tyypitys (tyyppi 1 vs tyyppi 2). Tutkimus tilataan, jos potilaalla on kliinisesti yleistynyt verenvuototaipumus (toistuvia verenvuotoja) ja muut laboratoriolöydökset toistetusti viittaavat vW-tautiin. Tutkimusta käytetään tyypin 2 vW-taudin alatyypityksessä.

P -vWF2N: von Willebrandin taudin alatyypitys. Lievän A-hemofilian ja 2N-tyypin von Willebrandin taudin erotusdiagnostiikka. 

Lähete/tutkimuksen tilaaminen

Sähköinen pyyntö tai Hyytymistutkimukset lähete / Remiss for koagulationsundersokning i Huslab. 

Huom! Tutkimusta P -vWF-Akt tehdään päivystyksenä Tampereella pyynnöllä 16334 P -vWFpaiv (ks. erillinen ohjekirjan sivu).

P -vWF-Ty: Sähköistä pyyntöä tehdessä vastataan seuraaviin esitietokysymyksiin (vastaavat tiedot tulee käydä ilmi paperilähetteestä):
- Onko perinnöllinen vWD -epäily?
- Onko tyyppi 2 vWD -epäily?
- Onko hankinnainen vWD -epäily?
- Lisätietoja?
- Lähettävä lääkäri
- Lähettävän lääkärin puh.numero
Tutkimusta P -vWF-Ty pyydettäessä tulee tilata myös tutkimukset 6334 P -vWF-Akt, 4031 P-vWF-Ag, 6073 P-vWF-CB ja 1097 P-FVIII, jotka ovat välttämättömiä tuloksen oikealle tulkinnalle.

P -vWF2N: Sähköistä pyyntöä tehdessä vastataan esitietokysymykseen "Lisätietoa tulkitsijalle?".

Potilaan esivalmistelu

Diagnostiset näytteet kannattaa ottaa vasta, kun akuutin faasin reaktion aiheuttamista tilanteista (esim. akuutti infektio, leikkaus, suuri vuoto) on kulunut vähintään 3 viikkoa, raskauden päättymisestä vähintään 3 kk.

P -vWF-Ty: Näytteenotto pyritään ajoittamaan mahdollisimman stabiiliin vaiheeseen, ja kun mahdollisesta korvaushoidosta on kulunut riittävä aika (vähintään 72 tuntia).

Näyteastia

Hukkaputki: lisäaineeton putki 5/4 ml tai hyytymistekijäputki 5/2,7 ml  tai 5/2 ml (vastasyntyneillä mikroputki 1 ml)
Hyytymistekijäputki (Na-sitraatti 3.2%, 0.109M) 5/2,7 ml tai vastaava putkikoko (pikkulapsilla mikroputki 1.0 ml)

Näyte

Hukkanäyte: 2 ml verta lisäaineettomaan tai sitraattiputkeen (vastasyntyneillä 1 ml, keskosista hukkanäytettä ei oteta)
Varsinainen näyte: 2.7 ml verta sitraattiputkeen merkityn täyttöasteen mukaan  (pikkulapsilla vähintään 1 ml). Ei ihopistonäytteenottoa!

Näytteen säilytys, kuljetus ja esikäsittely

P -vWF-Akt, P -vWF-Ag, P -vWFCB: Näyte säilyy erottelematta huoneenlämmössä 8 tuntia. Pakkaa näytteet kuljetuksen ajaksi hemostaasinäytteille tarkoitettuun kuljetuspakkaukseen tai muuhun vastaavaan pakkaukseen, joka eristää näytteet lämpötilavaihteluilta. Jos näytettä ei toimiteta analysoitavaksi 8 tunnin kuluessa, se on sentrifugoitava (2500 g 15 min), plasma eroteltava kahteen polypropeeniputkeen ja lähetettävä pakastettuna. Lisätietoa: fimlab.fi/yleisohjeet  --> Hemostaasitutkimusten näytteenotto-ohje.  Näytteitä voidaan käsitellä ja pakastaa Fimlabin Tampereen, Jyväskylän, Lahden ja Vaasan keskuslaboratorioissa.

P -vWF-Ty: Näyte on toimitettava HUSLAB-talon Automaatiolaboratorioon (hyytymistutkimukset). Näyte säilyy erottelematta kokoverenä huoneenlämmössä 4 tuntia. Näyte sentrifugoidaan (15 min 2500 g), plasma erotellaan kahteen muoviputkeen ja pakastetaan. Tarvittava sitraattiplasmanäytemäärä vähintään 0,5 ml (minimi 0,2 ml). Automaatiolaboratorio lähettää näytteet edelleen Ruotsiin hiilihappojäissä. Lähetyspäivä tiistai (tarvittaessa ma-to). 

P -vWF2N: Näyte säilyy erottelematta kokoverenä huoneenlämmössä 2 tuntia. Putki sentrifugoidaan (15 min 2500 g), plasma erotellaan kahteen muoviputkeen ja pakastetaan. Lähetys pakastettuna. Näytteitä voidaan käsitellä ja pakastaa Fimlabin Tampereen, Jyväskylän, Lahden ja Vaasan keskuslaboratorioissa.

Katso tarkemmat ohjeet: Ohjekirja/ Yleisohjeet/ HEMOSTAASITUTKIMUSTEN NÄYTTEENOTTO-OHJE HUS DIAGNOSTIIKKAKESKUKSEEN LÄHETETTÄVIÄ NÄYTTEITÄ VARTEN.

Menetelmä

P -vWF-Akt: von Willebrand -tekijä sitoutuu lateksipartikkeliin kiinnitettyyn trombosyytin rekombinantti-GPIb-reseptoriproteiiniin aiheuttaen mitattavan agglutinaation.
P -vWF-Ag: Fotometrinen, immunokemiallinen 
P -vWFCB: Immunokemiluminometrinen
P -vWF-Ty: Agaroosigeelielektroforeesin jälkeen von Willebrand -tekijän multimeerit siirretään nitroselluloosakalvolle ja osoitetaan vasta-aineen avulla (immunoblottaus). 
P -vWF2N: ELISA

Tekotiheys

P -vWF-Akt: Päivittäin
P -vWF-Ag: Päivittäin
P -vWFCB: Tarvittaessa arkipäivisin
P -vWF-Ty: Kerran kuussa

Tulos valmiina

P -vWF-Akt: 1 - 3 arkipäivän kuluessa
P -vWF-Ag: 1  - 3 arkipäivän kuluessa
P -vWFCB: 2 - 3 viikon kuluessa
P -vWF-Ty: 2 kk kuluessa 
P -vWF2N: 6 kk kuluessa

Viiteväli

P -vWF-Akt: 50 - 190 % *
P -vWF-Ag: 50 - 190 % * 
P -vWFCB: 55 - 180%*
P -vWF-Ty: Lausunto
P -vWF2N: Lausunto

*Viiteväli vaihtunut 25.3.2025 tekopaikka- ja menetelmämuutoksen vuoksi.

Tulkinta

Von Willebrand -tekijä (vWF) on tärkeä primaarihemostaasin ylläpitäjä. VWF pysäyttää trombosyytit verivirrasta spesifisten reseptorien välityksellä (glykoproteiinit Ib ja IIbIIIa) ja kiinnittää trombosyytit verisuonivaurion seurauksena paljastuneeseen kollageeniin. VWF toimii myös FVIII-kantajaproteiinina ja suojaa sitä inaktivaatiolta. Von Willebrandin taudissa vWF:n pitoisuus (vWF-Ag) ja/tai aktiivisuus (vWF-Akt) on alentunut, mikä johtaa vuototaipumukseen. 

Von Willebrandin taudin tyypityksessä käytetään von Willebrand -tekijän kollageeniin sitoutumiskykyä ((vWF collagen binding assay, vWF:CB). Alentunut kollageeniin sitoutumiskyky (vWFCB) viittaa suurikokoisten vWF-multimeerien puuttumiseen, kuten von Willebrandin tauti tyyppi 2A ja 2B potilailla. Tyyppi 3 potilailla sitoutumiskapasiteettia ei ole, koska vWF puuttuu. Kollageeniin sitoutumiskyky tulee määrittää vain osana VW-taudin diagnostiikkaa.

Tyyppi 2A VWD:ssa suuret ja keskisuuret, tyyppi 2B VWD:ssa suuret VWF:n multimeerit puuttuvat. Tyyppi 1 ja muissa tyyppi 2 VWD (2M ja 2N) muodoissa vWF:n multimeerit ovat normaalit.

Von Willebrand -tekijä, joka toimii hyytymistekijän VIII kantajamolekyylinä, voi olla poikkeva siten, että se ei kykene sitomaan FVIII:aa normaaliin tapaan. Seurauksena on kliinisesti hemofiliaa muistuttava, mutta autosomaalisesti periytyvä von Willebrandin taudin 2N-tyyppi.

Virhelähteet

Näytteen säilyttäminen tai kuljettaminen kylmässä (alle 8 °C) ennen näytteen analysointia tai käsittelyä ja pakastamista voi aiheuttaa virheellisen matalia tuloksia von Willebrand -tekijän määrityksissä. 

Lisätiedot

P -vWF-Akt ja P -vWF-Ag kuuluvat osatutkimuksina tutkimuspakettiin 3355 P -Vuotot (Vuototaipumuksen selvittely). 

P -vWF-Ty: Tutkimushinnan lisäksi tilaajalta laskutetaan hiilihappojäälähetyksen kulut.

Aiheeseen liittyvät muut ohjeet