BAKTEERI, NUKLEIINIHAPPO (KVAL)
Indikaatiot
Epäily steriilin alueen bakteeri-infektiosta, erityisesti jos bakteeriviljely on negatiivinen esimerkiksi antibioottihoidon tai näytteessä mahdollisesti esiintyvän bakteerin vaikean viljeltävyyden vuoksi.
Lähete/tutkimuksen tilaaminen
Näytteen laatu tai ottokohta merkittävä pyynnön lähete-kohtaan. BaktNhO-tutkimuksen näytteet pitää ottaa aseptisesti ja lähettää erillisessä näyteputkessa, johon ei voida yhdistää muita tutkimuspyyntöjä, koska näytteet vaativat erikoiskäsittelyn.
Näyteastia
Steriili tai tehdaspuhdas putki tai purkki.
EDTA- tai sitraattiputki.
Näyte
Steriilin alueen näytteet (kudospala tai aspiraatti): Steriilissä tai tehdaspuhtaassa putkessa/purkissa. Kudospalaan (halkaisija mielellään yli 3 mm) voidaan lisätä hieman steriiliä keittosuolaliuosta kuivumisen estämiseksi.
Likvori, lapsivesi tai muu hyytymätön neste (1-10 ml): Steriilissä tai tehdaspuhtaassa putkessa.
Nivelneste, luuydin ja pleuraneste: vähintään 1 ml EDTA- tai sitraattiputkeen.
Tutkimusta ei ole tarkoitettu tehtäväksi verinäytteestä eikä näytteistä, joissa oletettavasti esiintyy normaaliflooran bakteereita.
Näytteen säilytys, kuljetus ja esikäsittely
Näyte säilyy viikonlopun yli jääkaapissa. Lähetys huoneenlämmössä.
Menetelmä
Bakteerin osoitus 16s rRNA:ta koodaavan geenin monistuksella (PCR). Positiivisessa tapauksessa monistetun bakteeri DNA:n sekvensointi ja sekvenssin vertailu sekvenssitietokantoihin.
Tulos valmiina
Noin viikon kuluessa. DNA-sekvensointi ja lopullisen lajinimen varmistuminen saattaa kestää hieman kauemmin.
Tulkinta
Positiivinen PCR-tulos viittaa yhden tai useamman bakteerin läsnäoloon näytteessä. Yhden bakteerin aiheuttamissa infektioissa pystytään aiheuttaja yleensä tunnistamaan ainakin sukutasolle. PCR-tuotteen sekvensointi ei onnistu jos bakteeria on näytteessä hyvin vähän.