HERPES SIMPLEX VIRUS, NUKLEIINIHAPPO (KVAL)
Johdanto
Reaaliaikainen PCR-menetelmä herpes simplex virusten (HSV1 ja HSV 2) osoittamiseen ja erittelyyn.
Indikaatiot
Keskushermoston HSV-infektioepäilyt (enkefaliitit, meningiitit), vastasyntyneen infektioepäily.
Herpesvirusten erotusdiagnostiikka rakkulaihottumassa, limakalvomuutoksissa tai silmäoireisilla.
Lähete/tutkimuksen tilaaminen
ATK-pyyntö. Mikäli ATK-pyyntöä ei voida tehdä, tulee käyttää Fimlabin yleislähetettä.
Kiireellisissä tapauksissa aina otettava yhteyttä laboratorioon.
Näyte
Hoitoyksikkö ottaa näytteet, näytteitä ei oteta laboratoriossa.
Selkäydinnestenäyte/Likvor:
(0.5 - ) 1 ml selkäydinnestettä steriilissä erillisessä kertakäyttöputkessa. Putki suljetaan tiiviisti ja toimitetaan välittömästi laboratorioon.
Haavauma-, rakkula- , silmän sidekalvo- ja limakalvonäytteet:
UTM, Copan (353C, punainen neste, punainen korkki), huom! pakkaus ei sisällä nukkatikkua
Näytteet otetaan jäykkävartisella nukkatikulla näytekuljetusputkeen. Rakkulanäyte tulisi ottaa infektoituneelta alueelta tuoreesta rakkulasta. Rakkulan kansi avataan ja neste imeytetään näytteenottotikkuun, jolla vielä hangataan leesion pohjaa. Limakalvonäytettä (kohdunsuu, nielu, ym) tai silmän sidekalvonäytettä otettaessa tikulla hangataan näytteenottokohtaa, jotta näytteeksi saadaan infektoituneita soluja. Tikku laitetaan näytteenottoputkeen, tikun varsi katkaistaan ja korkki suljetaan huolellisesti.
HUOM! Mikäli silmään on tehty fluoreseiini-värjäys, tulee väriaine huuhdella huolellisesti silmästä ennen näytteenottoa (fluoreseiini voi inhiboida PCR-reaktiota).
Biopsiat ja kudospalat:
Fysiologiseen keittosuolaan kostutettuun kääreeseen ja steriiliin purkkiin.
EDTA-plasma 3/5ml, plasma tulisi erotella kokoverestä vuorokauden kuluessa.
Näytettä otettaessa on kiinnitettävä erityistä huomiota kontaminaation välttämiseen. Kaikkien näytettä käsittelevien on ennen putken sulkemista käytettävä kertakäyttöhansikkaita ja hengitysmaskia. Näytettä ei saa käsitellä henkilö, joka parhaillaan potee HSV-kynsivallintulehdusta tai huuliherpestä.
Näyteputkessa tulisi olla liimattuna vain yksi tarra, useampi tarra päällekäin aiheuttaa ongelmia analysaattorilla.
Näytteen säilytys, kuljetus ja esikäsittely
Näyte tulee välittömästi toimittaa laboratorioon. Mikäli näytettä ei voida toimittaa heti, se tulee säilyttää jääkaapissa. Näyte säilyy edustavana jääkaappilämpötilassa noin 5 vrk.
Menetelmä
Polymeraasiketjureaktio (PCR)
Tekotiheys
Arkipäivisin
Tulos valmiina
3 vuorokauden kuluessa
Tulkinta
Positiivinen tulos kertoo, että näytteessä on osoitettavissa Herpes simplex viruksen nukleiinihappoa. Positiivinen tulos vastataan tyypitettynä HSV-1 tai HSV-2.
Soitettavat hälyttävät tulokset
Likvorin positiiviset löydökset
Virhelähteet
Hepariiniplasma ei sovellu tutkimukseen.