ADAMTS13, aktiivisuus

Johdanto

ADAMTS13  (A distegrin and metalloproteonase with a thrombospondin type 1 motif, member 13) on von Willebrand -tekijää pilkkova entsyymi, joka säätelee suurten multimeerien määrää verenkierrossa. Entsyymiaktiivisuuden alentuessa normaalia suurempia multimeerejä kumuloituu verenkiertoon aiheuttaen intravaskulaarista trombosyyttiaggregaatiota ja mikrotrombooseja. Tila voi johtaa tromboottiseen mikroangiopatiaan.

Tromboottinen trombosytopeeninen purppura (TTP) on harvinainen tromboottisten mikroangiopatioiden ryhmään kuuluva sairaus, jonka taustalla on hankinnainen (n. 95 %) tai perinnöllinen (< 5%) ADAMTS13-entsyymin toimintavaje. Hankinnaisessa tautimuodossa immuunijärjestelmä muodostaa ADAMTS13-entsyymin toimintaa estäviä vasta-aineita. Perinnöllisessä taudissa entsyymiä muodostuu geenivirheen johdosta liian vähän tai se ei toimi normaalilla tavalla. TTP on vakava, jopa kriittinen sairaus, johon kuolee 10-20 % sairastuneista hoitokeinoista huolimatta. Varhainen diagnoosi on ratkaiseva lopputuloksen kannalta. Diagnoosi on ensisijaisesti kliininen ja sen tueksi on kehitetty erilaisia kansainvälisiä pisteytyksiä (esim. PLASMIC, French).

Tämä tutkimus mittaa ADAMTS13-entsyymin aktiivisuutta. Aktiivisuuden ollessa hyvin matala ADAMTS13 vasta-aineet voidaan tarvittaessa määrittää erillisellä tutkimuksella hankinnaisen ja perinnöllisen tautimuodon erottamiseksi  (kts. Lisätiedot).

Tiedustelut

Asiakaspalvelu ja neuvonta, p. 03 311 77800

Tutkimuksen tekee TAYS Verikeskus, p. (03) 311 76550

Indikaatiot

Tromboottisen trombosytopeenisen purppuran (TTP) diagnostiikka ja seuranta.

Lähete/tutkimuksen tilaaminen

Sähköinen pyyntö. Näyte ei sovellu hajautettuun näytteenottoon. 

Tampereen ulkopuolelta tulevasta näytteestä pyydetään ilmoittamaan laboratorioon:
Hämeenlinna, p. 041 732 0865 (päivystysaikana p. 041 732 0860)
Lahti, p. 041 731 3775
Jyväskylä, ma-pe klo 8-16 p. 014 2692351 / 050 309 6297 ja muina aikoina p. 014 2691552. 
Vaasa, ma-pe 8-15 p. 041 731 2347 ja muina aikoina p. 06 213 2520

Näyteastia

Na-sitraatti (3.2%, 0.109M) 5/2,7 ml tai vastaava putkikoko. 

EDTA-näyte ei kelpaa tutkimukseen missään tapauksessa.

Näyte

3.2% Na-sitraattiplasma. Näyte otettava merkkiviivaan asti. Ota hukkaputki (ylimääräinen Na-sitraattiputki) ennen varsinaista näytettä.

Tutkimus ei sovellu hajautettuun näytteenottoon.
Näytettä ei saa lähettää putkipostilla.

Näytteen säilytys, kuljetus ja esikäsittely

Näyte voidaan lähettää erottelemattomana huoneenlämmössä, mikäli se saapuu jatkokäsittelyyn Fimlabin Tampereen keskuslaboratorioon mieluiten 5 h (enintään 8 h) kuluessa näytteenotosta. Näyte sentrifugoidaan Tampereen näytekäsittelyssä manuaalisentrifugilla. Jos näyte ei ehdi Tampereelle 8 h sisällä, näyte on sentrifugoitava (15 min, 2500 g), plasma eroteltava ja pakastettava (-70C). Eroteltu plasma lähetetään pakastettuna.

Menetelmä

CLIA

Tekotiheys

Päivittäin

Tulos valmiina

Samana päivänä (päivystystutkimus)

Viiteväli

Aikuiset 60 - 130 %

Kirjallisuuden mukaan vastasyntyneillä normaali ADAMTS13-aktiivisuus voi olla myös aikuistasoa pienempi mutta kuitenkin yli 10 %.

Tulkinta

Tulokset tulee aina tulkita suhteessa kliiniseen kuvaan ja muihin laboratoriolöydöksiin.

Tromboottisessa trombosytopeenisessa purppurassa (TTP) oireissa ja löydöksissä on päällekkäisyyttä muihin TMA-ryhmän sairauksiin. ADAMTS13-aktiivisuutta voidaan käyttää apuna erotusdiagnostiikassa; TTP-diagnoosia vahvistavana löydöksenä pidetään ADAMTS13-aktiivisuutta alle (5-)10 % TMA-potilaalla. Aktiivisuuden alentuminen voi olla pysyvää (geneettistä) tai hankinnaista. Hankinnaista tilaa voivat aiheuttaa mm. autovasta-aineet, joita muodostuu joko spontaanisti tai liittyen esim. raskauteen, autoimmuunitauteihin, infektioihin tai lääkitykseen. Kardiovaskulaaristen sairauksien, uremian ja maksakirroosin yhteydessä on tavattu myös pienentyneitä ADAMTS13-aktiivisuustasoja.

Kaikilla kliinisen TTP-diagnoosin saaneilla potilailla ei kuitenkaan todeta vaikeaa ADAMTS13-puutosta.  Tromboottisessa trombosytopeenisessä purppurassa ADAMTS13-aktiivisuuden on todettu olevan osittain alentunut 70-100%:lla ja voimakkaasti alentunut 40-90%:lla potilaista. Toisaalta TTP:n lisäksi myös mm. hemolyyttis-ureemiseen syndroomaan, sepsikseen, kantasolu- ja elinsiirtoihin sekä joihinkin lääkityksiin voi liittyä voimakkaasti alentuneita (≤ 10 %) pitoisuuksia. TTP-diagnoosi onkin edelleen ensisijaisesti kliininen.

Hankinnaisessa taudissa vasta-aineiden pitoisuus  voidaan määrittää erillisellä tutkimuksella (P -ADAM-Ab, kts. Lisätiedot). Perinnöllinen tautimuoto puolestaan voidaan vahvistaa geneettisellä tutkimuksella.

Virhelähteet

EDTA on voimakas ADAMTS13:n toiminnan estäjä eikä EDTA:ta sisältäviä näytteitä tule käyttää analyysiin poikkeustilanteissakaan.

Reumatekijä voi aiheuttaa todellista matalampia tuloksia.

Lisätiedot

ADAMTS13-vasta-aineiden (P -ADAM-Ab) löytyminen viittaa tromboottisen trombosytopeenisen purppuran  hankinnaiseen muotoon. Vasta-aineet voidaan osoittaa ELISA-menetelmällä Ruotsissa tehtävällä alihankintatutkimuksella. Tämä jatkotutkimus tulee tehdä vain potilaille joiden ADAMTS13-aktiivisuus on hyvin matala (< 10%). Hoitoyksikkö täyttää tämän Karolinska ADAMAb-Remiss - lähetteen ja näytteeksi otetaan 2x 3 ml Na-sitraattiverta (eroteltu plasma lähetetään pakastettuna hiilihappojäissä). Vastaus on valmiina 2-3 viikon kuluessa.